Arboriculture & Urban Forestry 47(3): May 2021 pour R. lauricola, dans le but d’éliminer la nécessité d’une confir- mation du diagnostic en laboratoire. Nous avons validé la robus- tesse du test en utilisant un équipement sur plan de travail avec des échantillons naturellement infectés. Par la suite, nous avons validé le test directement sur le terrain à l’aide d’un appareil por- tatif. Résultats: Le test a permis de détecter avec succès R. lauri- cola directement à partir de tissus de bois symptomatiques en utilisant des extraits bruts d’ADN. En outre, le test a permis aux utilisateurs de distinguer facilement les symptômes causés par l’infection à R. lauricola de symptômes semblables causés par d’autres agents. Sur le terrain, nous avons analysé des échantil- lons de bois provenant d’avocatiers de Caroline symptomatiques (Persea borbonia [L.] Spreng) et de sassafras (Sassafras albidum [Nutt.] Nees) récoltés un peu partout dans le Sud-est et avons réussi à détecter des arbres infectés par R. lauricola en moins d’une heure. Conclusion: Les résultats de cette étude ont confirmé que le test AIMB, apte à être déployé sur le terrain, est robuste et peut rapidement détecter avec précision R. lauricola dans les arbres infectés directement, in situ. La technologie AIMB est bien adaptée à une application sur le terrain et ces résultats servent d’incitation à en poursuivre le développement et l’utilisation dans le domaine de la pathologie forestière. Zusammenfassung. Hintergrund: Die Lorbeerwelke-Krank- heit hat im Südosten der Vereinigten Staaten zu einem weitgehen- den Absterben von Lorbeerarten geführt. Der Erreger ist ein invasiver Pilz (Raffaelea lauricola) der ein Symbiont des Käfers Xyleborus glabratus ist und eine schnelle, tödliche Gefäßwelke verursacht. Eine frühe Diagnose der Lorbeerwelke ist für eine effiziente Krankheitsbekämpfung unerlässlich. Der derzeitige Diagnoseprozess ist jedoch aufgrund der langwierigen Laborver- fahren, die zur Bestätigung des Erregernachweises erforderlich sind, langsam. Methoden: Wir testeten die Robustheit und Feld- portabilität eines kürzlich entwickelten, artspezifischen, schleif- envermittelten isothermen Amplifikationstests (LAMP) für R. lauricola, mit dem Ziel, die Notwendigkeit einer Laborbestäti- gung der Diagnose zu vermeiden. Wir haben die Robustheit des Assays unter Verwendung von Benchtop-Geräten mit natürlich infizierten Proben getestet. Anschließend prüften wir den Assay direkt im Feld mit einem tragbaren Gerät. Ergebnisse: Der Assay wies erfolgreich R. lauricola direkt aus symptomatischem Holzgewebe unter Verwendung von rohen DNA-Extrakten nach. Darüber hinaus erlaubte der Assay den Anwendern eine einfache Unterscheidung zwischen Symptomen, die durch eine R. lauricola- Infektion verursacht wurden, und ähnlichen Symptomen, die durch Arboriculture & Urban Forestry Quiz Questions To complete this quiz, go to the ISA website, log into your MyISA account, and make your way to the page for Arboriculture & Urban Forestry CEU Quizzes (wwv.isa-arbor.com/store/ceuquizzes/113). Add the quiz to your cart, proceed through checkout, and look for the content to appear on your personal dashboard under the header, “My Quizzes.” If you need a username and password, send us an e-mail (
[email protected]). A passing score for this quiz requires sixteen correct answers. Quiz results will display immediately upon quiz completion. CEU(s) are processed immediately. You may take the quiz as often as is necessary to pass. CEU quiz by Eric North, University of Minnesota, Minneapolis, MN, USA ©2021 International Society of Arboriculture 109 andere Erreger verursacht wurden. Im Feldversuch haben wir Holzproben von symptomatischen Rotbuchen (Persea borbonia [L.] Spreng) und Sassafras (Sassafras albidum [Nutt.] Nees) im Südosten des Landes untersucht und R. lauricola-infizierte Bäume in weniger als einer Stunde erfolgreich nachgewiesen. Schlussfolgerung: Die Ergebnisse dieser Studie bestätigen, dass der im Feld einsetzbare LAMP-Assay robust ist und R. lauricola in infizierten Bäumen direkt vor Ort schnell und genau nach- weisen kann. Die LAMP-Technologie eignet sich gut für den Einsatz im Feld, und diese Ergebnisse dienen als Anreiz für die weitere Entwicklung und Anwendung dieser Technologie im Bereich der Forstpathologie. Resumen. Antecedentes: la enfermedad de Laurel ha causado extensa mortalidad de especies lauraceas en el sureste de los Esta- dos Unidos. El agente causal es un hongo invasivo, Raffaelea lauricola, que es un simbionte del escarabajo Xyleborus glabra- tus, y causa un rápido y fatal marchitamiento vascular. El diag- nóstico precoz de la marchitamiento de laurel es imperativo para un manejo eficiente de la enfermedad. El proceso de diagnóstico actual, sin embargo, es lento debido a los largos procedimientos de laboratorio necesarios para confirmar la presencia de patógenos. Métodos: probamos la robustez y la portabilidad en el campo de un ensayo de amplificación isotérmica (LAMP) recien- temente desarrollado, específico para R. lauricola, con el objetivo general de eliminar la necesidad de una confirmación del diag- nóstico de laboratorio. Probamos la robustez del ensayo utilizando equipos de sobremesa con muestras infectadas naturalmente. Luego probamos el ensayo directamente en el campo usando un dispositivo portátil. Resultados: El ensayo detectó con éxito R. lauricola directamente del tejido de madera sintomático utili- zando extractos de ADN crudo. Además, el ensayo permitió fácil- mente a los usuarios distinguir entre los síntomas causados por la infección por R. lauricola y síntomas similares causados por otros agentes. En el campo, ensayamos muestras de madera sin- tomática de Persea borbonia [L.] Spreng y Sassafras albidum [Nutt.] Nees en todo el sureste y se detectaron con éxito, en menos de una hora, árboles de R. lauricola infectados. Con- clusión: Los resultados de este estudio confirmaron que el ensayo LAMP desplegable sobre el terreno es robusto y puede detectar rápida y precisamente R. lauricola en árboles infectados direct- amente in situ. La tecnología LAMP es adecuada para la imple- mentación en el campo; estos resultados sirven como un incentivo para el desarrollo y uso de esta tecnología en el campo de la patología forestal.
May 2021
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